⑴ 膠體金試紙條的測試原理是什麼
膠體金快速檢測卡是採用膠體金免疫層析技術研製而成的,此技術是90年代初在免疫滲透技術的基礎上建立的一種快捷簡單的免疫學檢測技術,市場上一般用到的有雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、小分子競爭法等等。 膠體金是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,金離子還原後聚合成的一定大...小的金顆粒,它由一個基礎的晶核(11個金原子形成的二十面體)和包圍在外的雙離子層構成(內層為負離子層AuCl2-,外層是帶正電荷的H+)。由於靜電作用,金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩定的膠體狀態,形成帶負電的疏水膠溶液,故稱膠體金。 。質量差的溶液燒制後,液面有漂浮物,大小不一,形狀各異。膠體金顆粒大小,決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色,由紅到紫色。 膠體金一般在弱鹼環境下帶負電荷,會與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合,一般稱這種結合叫靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。除了與蛋白質結合以外,它還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應,加上結合物的免疫和生物學特性,從而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 膠體金標記技術,實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。用於膠體金標記的蛋白必須要經過前處理,其目的在於 1、去除高濃度的鹽分,高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結合,或導致膠體金粒子的凝聚,這一步往往採用低濃度緩沖液來進行。 2、使蛋白分子盡量分散為單體,凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚為多聚體大分子,可同時與多個膠體金粒子結合,影響標記的靈敏度和定量分析。 3、使蛋白具有適當的分子量。蛋白分子量過小(30 kD),形成的蛋白復合體往往是不穩定,可短時間內失活。而分子量過大時,被認為影響探針的靈敏度,特別是已知蛋白的結構與活性中心的情況下,去除對活性影響的結構部分是提高標記靈敏度,延長探針壽命(防止凝集)的有效辦法。把分子量過小的蛋白與其它蛋白(如牛血清蛋白等)結合後,能制備出穩定性更強的探針。 當蛋白前處理完成後,接著要確定膠體金與蛋白結合的最佳pH值。對於理化性質不確定的蛋白這一步尤為重要。過量的蛋白與不同pH值的膠體金結合後,只有某一特定pH值能夠形成結合最穩定的探針。在高濃度電解質(如NaCl)作用下不會凝聚。不同蛋白的適宜pH范圍的寬窄大不相同。一般選擇最小適宜pH值為最佳pH值。但有些探針的實際情況並不完全如此,最穩定的探針並不完全代表活性最好,這要靠實驗驗證。 在確定最佳pH值後,最後要確定最小蛋白量,即能夠形成穩定探針的蛋白的最小量。如果在制備探針時加入太多的蛋白,不僅造成浪費,而且更為嚴重的是容易造成探針凝聚,並嚴重影響標記活性。因為探針溶液中的游離蛋白容易搶先與標記位點結合,起到「封閉」(Blocking)作用,而膠體金探針標記不上。在標記位點希少、被標記物含量較少的情況下要特別注意。 膠體金具有很高的動力學穩定性,在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢,可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚,但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩定性,如蛋白質、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩定效果。. 當金溶膠吸附蛋白質後,溶膠的穩定性隨溶液pH而變化,而這種變化又取決於吸附蛋白質的等電點,如ConA,過氧化物酶等,當pH較低時保持穩定,提高pH則顯得不穩定,接近等電點或略高時又變得穩定了。標記後的膠體金溶液可用0.2~0.5mg/ml PEG20000 作為穩定劑。在4~10℃貯存數月有效,不宜冰凍。貯存中可能會發生程度不同的凝聚,可離心除去。 當今國內有很多膠體金試紙條生產廠商,江浙這一帶尤為突出,推薦廠家:蘇州快捷康生物技術有限公司。
⑵ 膠體金判讀儀具體是干什麼用的儀器能檢測哪些
膠體金檢測技術就是利用膠體金作為跟蹤標志
對食品中的抗原體進行標記
進而得出檢測結果的一種免疫標記檢測技術
具有檢測方便
結果明確的特點
膠體金分析儀就是對膠體金試劑卡檢測結果進行判讀的儀器
可用於食品安全監管中的快速檢測
在醫學實驗室用於對人體液樣本中待測物濃度進行判讀
⑶ 膠體金檢測儀有什麼優勢
膠體金檢測儀優勢如下:
儀器新增了膠體金模塊檢測方式:軌道式自動傳輸掃描,檢測完成後自動退出試紙。採用了智能化的操作平台,先進的光源驅動及檢測技術,具有便捷的操作方式,優異的檢測精度,實現了結果可靠與高效測量的完美統一。
用戶通過大尺寸彩色觸摸屏,以及圖形化的操作界面引導,通過幾個簡單步驟即可輕松完成整個測試。儀器直接顯示被測物質含量,並通過與內置標准進行比對,自動判定結果是否合格。支持編輯及新建檢測方法,可完全滿足對精度有更高要求的客戶需要。
⑷ 什麼是膠體金(金標)檢驗法
膠體金是一種常用的標記技術,有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。免疫膠體金技術的基本原理是:氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液。由於靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱膠體金。膠體金標記,實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。免疫金標記技術(Immunogoldlabellingtechique)主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,在金標蛋白結合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當這些標記物在相應的配體處大量聚集時,肉眼可見紫色斑點,因而用於定性或半定量的快速免疫檢測方法中。
⑸ 膠體金為什麼不能定量檢測
定量膠體金抗原稀釋用什麼基質液
是以膠體金作為示蹤標志物應用於抗原抗體的一種新型...以0.005mol/l
ph9.0硼酸鹽緩沖液做系列稀釋為...成功地應用於pcg的檢測,直接應用分光光度計進行定量
⑹ 膠體金快速檢測卡是不是和elisa是一個原理
免疫膠體金技術的基本原理:
膠體金在弱鹼環境下帶負電荷,可與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合,由於這種結合是靜電結合,所以不影響蛋白質的生物特性。膠體金除了與蛋白質結合以外,還可以與許多其它生物大分子結合,如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀,如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應,加上結合物的免疫和生物學特性,因而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。膠體金標記,實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附機理可能是膠體金顆粒表面負電荷,與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑、也就是不同顏色的膠體金顆粒。這種球形的粒子對蛋白質有很強的吸附功能,可以與葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價結合,因而在基礎研究和臨床實驗中成為非常有用的工具。免疫金標記技術(Immunogoldlabellingtechnique)主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,在金標蛋白結合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當這些標記物在相應的配體處大量聚集時,肉眼可見紅色或粉紅色斑點,因而用於定性或半定量的快速免疫檢測方法中,這一反應也可以通過銀顆粒的沉積被放大,稱之為免疫金銀染色。
原理
1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(,ELISA)用於IgG定量測定的文章,使得1966年開始用於抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,並保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最後結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物後,底物被酶催化變為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由於酶的催化效率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
⑺ 膠體金法檢測流程
這個要看哪家生產的什麼產品了,檢測的樣本不同,一般檢測方法也不大相同,但是基本上都是先採樣、後樣本處理(非必須)、後滴加檢測液,後判讀結果。膠體金檢測法快速准確,操作簡單,結果直觀,適合基層檢測和大眾使用,以上海快靈的黃麴黴毒素檢測卡為例,樣本前處理(粉碎)-----樣本提取(10分鍾)-----樣本檢測(滴加檢測液)--------判讀結果(5分鍾)
⑻ 快速膠體金法檢測艾滋病准確度高嗎
如果是假陽性,你的檢測結果就不會顯示陰性了,可以排除了窗口期三月定論是以前的主流,主要是檢測技術的問題。現在四代檢測很快,一個月完全排除。你的症狀雖然和艾滋病類似,但不一定就是感染了艾滋,可能是別的原因引起的,或者是心裡壓力太大了,我朋友在京 東上買的AWARE的2個月就上陰性,後去醫院皮膚科做檢測。都是陰性,所以,不用擔心了。