⑴ 胶体金试纸条的测试原理是什么
胶体金快速检测卡是采用胶体金免疫层析技术研制而成的,此技术是90年代初在免疫渗透技术的基础上建立的一种快捷简单的免疫学检测技术,市场上一般用到的有双抗体夹心法、双抗原夹心法、小分子竞争法等等。 胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,金离子还原后聚合成的一定大...小的金颗粒,它由一个基础的晶核(11个金原子形成的二十面体)和包围在外的双离子层构成(内层为负离子层AuCl2-,外层是带正电荷的H+)。由于静电作用,金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,故称胶体金。 。质量差的溶液烧制后,液面有漂浮物,大小不一,形状各异。胶体金颗粒大小,决定了我们用肉眼观察到的胶体金溶液颜色,由红到紫色。 胶体金一般在弱碱环境下带负电荷,会与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,一般称这种结合叫静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。除了与蛋白质结合以外,它还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,从而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记技术,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。用于胶体金标记的蛋白必须要经过前处理,其目的在于 1、去除高浓度的盐分,高浓度的盐分往往干扰蛋白与胶体金的吸附结合,或导致胶体金粒子的凝聚,这一步往往采用低浓度缓冲液来进行。 2、使蛋白分子尽量分散为单体,冻干蛋白或高浓度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚为多聚体大分子,可同时与多个胶体金粒子结合,影响标记的灵敏度和定量分析。 3、使蛋白具有适当的分子量。蛋白分子量过小(30 kD),形成的蛋白复合体往往是不稳定,可短时间内失活。而分子量过大时,被认为影响探针的灵敏度,特别是已知蛋白的结构与活性中心的情况下,去除对活性影响的结构部分是提高标记灵敏度,延长探针寿命(防止凝集)的有效办法。把分子量过小的蛋白与其它蛋白(如牛血清蛋白等)结合后,能制备出稳定性更强的探针。 当蛋白前处理完成后,接着要确定胶体金与蛋白结合的最佳pH值。对于理化性质不确定的蛋白这一步尤为重要。过量的蛋白与不同pH值的胶体金结合后,只有某一特定pH值能够形成结合最稳定的探针。在高浓度电解质(如NaCl)作用下不会凝聚。不同蛋白的适宜pH范围的宽窄大不相同。一般选择最小适宜pH值为最佳pH值。但有些探针的实际情况并不完全如此,最稳定的探针并不完全代表活性最好,这要靠实验验证。 在确定最佳pH值后,最后要确定最小蛋白量,即能够形成稳定探针的蛋白的最小量。如果在制备探针时加入太多的蛋白,不仅造成浪费,而且更为严重的是容易造成探针凝聚,并严重影响标记活性。因为探针溶液中的游离蛋白容易抢先与标记位点结合,起到“封闭”(Blocking)作用,而胶体金探针标记不上。在标记位点希少、被标记物含量较少的情况下要特别注意。 胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。. 当金溶胶吸附蛋白质后,溶胶的稳定性随溶液pH而变化,而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点,如ConA,过氧化物酶等,当pH较低时保持稳定,提高pH则显得不稳定,接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2~0.5mg/ml PEG20000 作为稳定剂。在4~10℃贮存数月有效,不宜冰冻。贮存中可能会发生程度不同的凝聚,可离心除去。 当今国内有很多胶体金试纸条生产厂商,江浙这一带尤为突出,推荐厂家:苏州快捷康生物技术有限公司。
⑵ 胶体金判读仪具体是干什么用的仪器能检测哪些
胶体金检测技术就是利用胶体金作为跟踪标志
对食品中的抗原体进行标记
进而得出检测结果的一种免疫标记检测技术
具有检测方便
结果明确的特点
胶体金分析仪就是对胶体金试剂卡检测结果进行判读的仪器
可用于食品安全监管中的快速检测
在医学实验室用于对人体液样本中待测物浓度进行判读
⑶ 胶体金检测仪有什么优势
胶体金检测仪优势如下:
仪器新增了胶体金模块检测方式:轨道式自动传输扫描,检测完成后自动退出试纸。采用了智能化的操作平台,先进的光源驱动及检测技术,具有便捷的操作方式,优异的检测精度,实现了结果可靠与高效测量的完美统一。
用户通过大尺寸彩色触摸屏,以及图形化的操作界面引导,通过几个简单步骤即可轻松完成整个测试。仪器直接显示被测物质含量,并通过与内置标准进行比对,自动判定结果是否合格。支持编辑及新建检测方法,可完全满足对精度有更高要求的客户需要。
⑷ 什么是胶体金(金标)检验法
胶体金是一种常用的标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。免疫胶体金技术的基本原理是:氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。免疫金标记技术(Immunogoldlabellingtechique)主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见紫色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中。
⑸ 胶体金为什么不能定量检测
定量胶体金抗原稀释用什么基质液
是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型...以0.005mol/l
ph9.0硼酸盐缓冲液做系列稀释为...成功地应用于pcg的检测,直接应用分光光度计进行定量
⑹ 胶体金快速检测卡是不是和elisa是一个原理
免疫胶体金技术的基本原理:
胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。免疫金标记技术(Immunogoldlabellingtechnique)主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。
原理
1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。这一方法的基本原理是:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。
⑺ 胶体金法检测流程
这个要看哪家生产的什么产品了,检测的样本不同,一般检测方法也不大相同,但是基本上都是先采样、后样本处理(非必须)、后滴加检测液,后判读结果。胶体金检测法快速准确,操作简单,结果直观,适合基层检测和大众使用,以上海快灵的黄曲霉毒素检测卡为例,样本前处理(粉碎)-----样本提取(10分钟)-----样本检测(滴加检测液)--------判读结果(5分钟)
⑻ 快速胶体金法检测艾滋病准确度高吗
如果是假阳性,你的检测结果就不会显示阴性了,可以排除了窗口期三月定论是以前的主流,主要是检测技术的问题。现在四代检测很快,一个月完全排除。你的症状虽然和艾滋病类似,但不一定就是感染了艾滋,可能是别的原因引起的,或者是心里压力太大了,我朋友在京 东上买的AWARE的2个月就上阴性,后去医院皮肤科做检测。都是阴性,所以,不用担心了。